Постановка эксперимента

Схема реакции:

Эфиры холестерина + Н2О холестерин + жирные кислоты

Холестерин + О2 4-холестен-3-он + Н2О2

Н2О2 + 4-ААП + фенол хинониминовый краситель + 4 Н2О

Исследуемый материал:

Сыворотка, гепаринизированная или ЭДТА-плазма крови без следов гемолиза.

Проба стабильная 7 дней при температуре 2-8˚С.

Состав набора:

Монореагент (250 мл)

Калибратор - раствор холестерина 5,17 ммоль/л (1,5 мл)

Подготовка реагентов к процедуре анализа и их стабильность:

Монореагент готов к применению; после вскрытия флакона монореагент стабилен не менее 6 месяцев при температуре 2-8 ˚С в защищенном от света месте. Тщательно закрывать флакон с монореагентом после каждого использования. Бледно-розовая окраска монореагента с величиной оптической плотности до 0, 200 А, измеренной против дистиллированной водой при длине волны 500 нм, не влияет на правильность определения холестерина в исследуемом образце.

Калибратор готов к применению; после вскрытия флакона калибратор стабилен не менее 6 месяцев при температуре 2-8 ˚С.

Невскрытые реагенты стабильны в течение года при температуре 2-8 ˚С, монореагент в защищенном от света месте.

Процедура анализа:

Компоненты реакционной смеси	Опытная проба	Калибровочная проба	Контрольная проба
Монореагент, мл	2,0	2,0	2,0
Сыворотка (плазма), мл	0,02	-	-
Калибратор, мл	-	0,02	-
Вода дистилл., мл	-	-	0,02

Реакционную смесь тщательно перемешайте и инкубируйте не менее 15 минут при комнатной температуре (18-25 ˚С) или 10 минут при температуре 37˚С. После окончания инкубации измерьте оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны 500 нм (490-540 нм). Окраска растворов стабильна в течение 1 часа после окончания инкубации при хранении проб в защищенном от света месте при комнатной температуре. Объемы исследуемого образца и монореагента можно изменить, соблюдая соотношение 1: 100.

Автоматические анализаторы:

Длина волны 500 нм

Измерение против Контрольной пробы

Метод измерения Конечная точка

Изменение оптической плотности Возраст

Температура 37 ˚С

Соотношение образец/реагент 1: 100

Время преинкубации 3 секунды

Время реакции 600 секунд

Предел абсорбции контрольной пробы 0, 200 А

Предел максимальной абсорбции 2,000 А

Калибратор 5,17 ммоль / л

Линейность 0,5-25,8 ммоль / л

Расчет концентрации холестерина (С, моль / л) проведите по формуле:

С= × 5,17 ммоль / л,

где Е пробы - ед. опт. плотность исследуемой пробы

Е калибр. - ед. опт. плотность калибровочной пробы

,17 ммоль / л - концентрация холестерина в калибраторе

Аналитические характеристики:

Линейность - 0,5-25,8 ммоль /л

Коэффициент вариации - не менее 5 %. Перейти на страницу: 1 2 

Другие статьи

Кузнецкий угольный бассейн как зона экологического бедствия Кузбасс - крупнейшее угольное месторождения мира, расположен в Западной Сибири, и является одним из наиболее значимых в экономическом отношении регионов России. Ведущая роль здесь принадлежит промышленному комплексу по добыче и переработке угля, железных руд и разнообр ...